Aleksandr Lobanov

August 2018 bis November 2019 Wärend meines Aufenthaltes bei Fraunhofer IME habe ich folgende Tätigkeiten durchgeführt: Klonierung Expression von rekombinanten Proteinen in Plant Cell Packs (PCPs) Agrobakterium-vermittelte Infiltration von Pflanzen Extraktion von Pflanzen Reinigung von rekombinanten Proteinen (IMAC) Bestimmung der thermischen und pH-Stabilität von Proteinen Bestimmung der Proteinkonzentration mittels Bradford Bestimmung der Proteinreinheit mittels Western Blot und SDS-PAGE

Hier führte ich folgende Tätigkeiten aus: Transformation in E. coli Plasmid Präparation Expression von rekombinanten Proteinen in E. coli (Kultivierung in Schüttelkolben und im LEX-System) Reinigung von rekombinanten Proteinen mittels verschiedener chromatografischer Methoden: Affinität, Ionenaustausch, Gelfiltration unter Verwendung des ÄKTA-Systems Anwendung analytischer Methoden wie SDS-PAGE, Western Blot, dynamische Lichtstreuung (DLS) Bestimmung von Proteinkonzentrationen (Bradford, Nano-Drop)

Isolierung von Nukleinsäuren aus Bakterien Restriktionsverdau und Ligation mit Plasmid-DNA Agarosegelelektrophorese Klonierungen Transformation von Plasmiden Gängige zellbiologische Arbeiten (Auftauen, Erhalten und Einfrieren von Zellen) Kontaminationskontrollen von Zellen Transfektionen mittels L-PEI und Überprüfung der Effizienz mit ß-Gal-Test Licht- und Fluoreszenzmikroskopie Ansetzen von Puffern und Lösungen